Validação de método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para quantificação da cafeína extraída da pele

Abstract

A alopecia androgênica, comumente conhecida como calvície, é uma condição genética e hormonal que causa perda de cabelo e afeta tanto homens quanto mulheres. Estudos sugerem que a cafeína pode promover o crescimento capilar e apresentar baixa toxicidade, tornando-se uma opção promissora de tratamento. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um método analítico para quantificar a cafeína extraída da pele, auxiliando no desenvolvimento de formulações tópicas para tratar a alopecia androgênica. O método foi desenvolvido por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com uma coluna de fase reversa C18 e a utilização de água ultra purificada e acetonitrila como fase móvel. Seguiram-se as diretrizes estabelecidas pela ANVISA e pelo ICH, avaliando os parâmetros de seletividade, linearidade, limites de detecção e quantificação, precisão e exatidão. No ensaio in vitro, foram utilizadas células de Franz para avaliar a permeabilidade cutânea do sérum e do controle. O método de CLAE foi otimizado com uma fase móvel proporcional de 90:10 (v/v), com fluxo de eluição de 0,7 mL/min, e o tempo de retenção da cafeína foi de aproximadamente 8 minutos. O método apresentou excelente seletividade, com valores estatisticamente não significativos entre os interferentes da pele. Demonstrou linearidade em uma faixa de concentração de 0,5 μg/mL a 15,0 μg/mL, com equação de regressão y = 31730 x + 3875,1 e r² de 0,9983. O limite de detecção foi estabelecido em 0,247 μg/mL, e o limite de quantificação em 0,748 μg/mL. Entretanto, o limite de quantificação experimental resultou em 0,249 μg/mL, com precisão e exatidão. O ensaio in vitro demonstrou a aplicabilidade do método analítico para quantificar a distribuição da cafeína nas camadas da pele. Portanto, este método analítico, validado, quantifica com precisão e exatidão a cafeína extraída da pele, conforme os parâmetros estabelecidos pela ANVISA e pelo ICH, demonstrando sua utilidade prática na análise e no desenvolvimento de formulações tópicas.