Caracterização da expressão gênica de GAP-43 como ferramenta para análise de neurotoxicidade induzida pelo zika vírus em células PC-12

Abstract

O presente estudo teve como objetivo a caracterização da expressão gênica de GAP43 como ferramenta de análise da neurotoxicidade causada pelo Zika Vírus (ZIKV) em células PC-12 diferenciadas ou não com fator de crescimento do nervo (NGF). As células foram cultivadas com os meios completo (MC) ou meio de diferenciação (MD) com concentrações de 100 ng/mL ou 200 ng/mL de NGF pelos períodos de 24 ou 48h, em placas tratadas com Poli-L-lisina (PLL) ou Colágeno IV. Para a análise da infecção pelo ZIKV as células PC-12 foram expostas ao ZIKV (MOI 1) pelo período de 2 horas e 24h depois da infecção a expressão gênica relativa de GAP-43 e quantificação do RNA viral nas foi determinada por transcrição reversa seguida pela amplificação por reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa (RT-PCRq). Nossos resultados demonstraram que as células PC-12 semeadas em placas tratadas com Colágeno IV obtiveram uma melhor adesão em comparação com o tratamento com PLL. Para as células não infectadas, a diferenciação com NGF 100 ng/mL ou 200 ng/mL, tanto no período de 24h como 48h, não alterou a expressão gênica de GAP-43. Para o pool de células infectadas pelo ZIKV em todas as variáveis analisadas houve aumento de expressão de GAP-43. Nossos dados mostram que o ZIKV infecta as células PC12 e altera a expressão gênica de GAP-43. Desse modo, as células PC-12 podem ser um modelo para o estudo de neurotoxicidade causada pelo ZIKV.