Ativação do receptor PPARγ na modulação da expressão proteica de iNOS em macrófagos

Abstract

Como medida farmacológica contra DM2, as tiazolidinedionas, como a rosiglitazona e pioglitazona, atuam como agonistas totais do receptor PPARγ e são eficazes no que se diz respeito à sensibilização de insulina, porém efeitos adversos graves condenam a utilização segura desses medicamentos. Logo, a procura do desenvolvimento de agonistas parciais do PPARγ como o GQ-16, inspira e visa a segurança clínica, a fim de evitar a toxicidade induzida por agonistas totais, propondo uma ativação mais equilibrada do receptor. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da rosiglitazona e GQ-16 na expressão proteica de iNOS em cultura de macrófagos 264.7 com ou sem presença de estímulo inflamatório, e analisar o envolvimento do receptor PPARγ com o antagonista, T007. As células foram tratadas com LPS (100 ng/ml), após 30 minutos, com o T007 (20 µM), e após 60 minutos, com a rosiglitazona (10-5 M), GQ-16 (10-5 M) ou DMSO (0,01%) por 24 horas. Após o tratamento, as células foram coletadas, lisadas, e analisadas por western blot, utilizando anticorpos anti-iNOS (1:1000) e anti GAPDH (1:4000). As bandas foram quantificadas por densitometria por meio do software Image J, e os dados foram processados estatisticamente e apresentados na forma de média +/- erro padrão da média (EPM), sendo comparados por teste U de Man-Whitney para 2 amostras ou Kruskal-Wallis para avaliação de múltiplos grupos experimentais com p < 0,05. Contudo, resultados obtidos não apresentaram significância estatística devido ao número limitado de experimentos (n=3), indicando a necessidade de estudos adicionais para confirmar essa hipótese. Logo, conclui-se que os agonistas de PPARγ são alvos promissores para o tratamento da obesidade e de doenças inflamatórias, porém novos experimentos devem ser executados.