Resistência às fluoroquinolonas em cepas de Escherichia coli isoladas de queijos artesanais

Abstract

Os queijos de origem artesanal fabricados com leite cru são mais suscetíveis a contaminação por Escherichia coli. O objetivo deste trabalho foi realizar a confirmação genética das cepas de E. coli isoladas de queijos Minas frescal de produção artesanal e avaliar a resistência dessas cepas às fluoroquinolonas. Foram analisadas 87 cepas de E. coli isoladas a partir de 22 queijos artesanais coletados em feiras permanentes do Distrito Federal. As análises moleculares foram realizadas a partir da PCR. Para a confirmação genética das cepas de E. coli foram utilizados os genes uidA e lacZB. E para a primeira etapa da pesquisa genética de resistência às fluoroquinolonas foram utilizados os genes gyrA e parC. Os resultados do antibiograma mostraram que 43,68% (38/87) das cepas de E. coli apresentaram algum tipo de resistência à ciprofloxacina e 35,63% das cepas (31/87) apresentaram multiresistência antimicrobiana. Nas análises moleculares, todas as 87 cepas de E. coli (100%) foram positivas para o gene uidA que codifica a enzima β- glucoronidase exclusiva da E. coli. O gene lacZB codifica a β-galactosidade e está relacionado com a presença de coliformes fermentadores de lactose como é o caso de E. coli. Portanto, para esse marcador, também se obteve 100% de cepas positivas. O gene gyrA que está relacionado com a produção da DNA girase apresentou 96,55% (84/87) de positividade. E o gene parC que está relacionado com a produção da topoisomerase IV obteve 100% (85/85) de positividade das amostras. Os genes gyrA e parC conferem resistência as fluorquinolonas através de mutações em aminoácidos das proteínas GyrA e ParC. Tais mutações remodelam a estrutura dessas proteínas do modo que ocorre uma diminuição de afinidade das quinolonas no alvo de ação, resultando assim, em resistência bacteriana a essas drogas. Essa foi a primeira etapa da pesquisa genética de resistência às quinolonas nas cepas de E. coli. Em estudos futuros, a segunda etapa da pesquisa irá verificar se os genes amplificados possuem mutações de aminoácidos que conferem resistência as quinolonas.