Avaliação da atividade neuroprotetora da molécula LDT 409 em modelo de neurotoxicidade induzida por cisplatina

Abstract

A neurotoxicidade é um efeito adverso comum que ocorre devido ao uso de algumas classes de quimioterápicos, como por exemplo, os derivados de platina (cisplatina, oxaliplatina e carboplatina). Esse efeito adverso é chamado de Neuropatia Periférica Induzida por Quimioterapia (NPIQ) quando atinge o Sistema Nervoso Periférico (SNP) e é caracterizada por perda sensorial, parestesia e dor neuropática, que prejudica tanto a terapia antitumoral quanto a qualidade de vida dos pacientes. Uma das maneiras de prevenir ou reverter esse efeito é através da neuroproteção. No presente trabalho, foi avaliada a potencial ação neuroprotetora do LDT 409 (composto sintetizado a partir de uma molécula isolada do líquido extraído da casca da castanha de caju), que em estudos prévios demonstrou atividade antioxidante e diminuiu a expressão de citocinas pró-inflamatórias. Assim, avaliamos se o LDT 409 seria capaz de prevenir a neurotoxicidade induzida pela cisplatina, que dentre outras alterações, promove aumento da expressão de citocinas próinflamatórias e inibição da neuritogênese in vitro. Dessa forma, para responder aos objetivos propostos, foi avaliada em células PC12 a viabilidade celular através da técnica de exclusão por azul de tripano, a quantificação gênica de da GAP-43 (marcador de neuroplasticidade) pela técnica de RT-PCRq em tempo real e a avaliação da morfologia e neuritogênese por microscopia óptica. Foi observado que 150 µM de cisplatina induziu morte celular, diferentemente do tratamento com LDT 409, que não se mostrou citotóxico nas concentrações testadas. A cisplatina na concentração de 50 µM diminuiu a expressão de GAP-43, enquanto a concentração de 150 µM não promoveu alteração da expressão gênica. Investigamos então se o LDT seria capaz de prevenir o efeito da cisplatina (50 µM) na expressão gênica de GAP-43 e observamos que o LDT 409 não preveniu esse efeito. Mesmo que a maior concentração de cisplatina não tenha alterado a expressão gênica de GAP-43, o cotratamento com LDT 409 aumentou a expressão desse gene. A cisplatina (150 µM) aumentou tanto o tamanho nuclear quanto celular, além de alterar o formato dessas células tornando-as esféricas. Além disso, verificamos se o LDT 409 possuía atividade neuritogênica e observamos que o composto não induziu o crescimento de neuritos. Assim, de acordo com os ensaios realizados, o LDT 409 não demonstrou efeito neuroprotetor em modelo de neurotoxicidade in vitro induzido por cisplatina em células PC12.