Efeito do peptído salamandrina-I sobre a viabilidade e proliferação da linhagem celular de leucemia mieloide aguda HL-60

Abstract

egundo a Organização Mundial da Saúde, a leucemia promielocítica aguda (LPA) é classificada como um subtipo de LMA e, embora represente menos de 10% de todas as formas de LMA, é uma doença de caráter agressivo e de rápida progressão. Medicamentos como ATRA (Ácido Trans Retinóico), ATO (trióxido de arsênio) e quimioterápicos (antraciclinas) são utilizados no tratamento padrão ouro da LPA. No entanto, potenciais efeitos adversos causados pelo ATRA e o desenvolvimento de resistência contra os quimioterápicos são obstáculos encontrados na prática médica. Recentemente, diversos estudos com peptídeos antioxidantes estão sendo realizados, e potenciais efeitos anticâncer tem sido identificados. Nesse sentido, este trabalho tem como objetivo avaliar se a Salamandrina-I, um peptídeo antioxidante recém identificado, tem ação sobre a viabilidade e proliferação de células HL-60. Inicialmente, realizamos o ensaio de MTT para avaliar a viabilidade das células e, posteriormente, validamos a apoptose e proliferação celular por citometria de fluxo. Utilizamos ainda a técnica de PCR em tempo real para avaliar o perfil transcricional das células HL-60 mediante a presença de Salamandrina-I. Em suma, observamos que Salamandrina-I é capaz de induzir apoptose de maneira dose dependente (IC25; p=0,0417) e IC50; p<0,0001), além de promover disfunção mitocondrial (IC25 e IC50 p<0,0001) na linhagem HL-60. Identificamos ainda que este peptídeo foi capaz de diminuir a proliferação das células HL-60 (IC25; p= 0,0012 e IC50; p <0,0001) e promover um aumento na expressão de vários genes envolvidos no inflamassoma como CASP1 (IC25 p=0,0303; IC50 p=0,0003), NLRP1 (IC25 p= 0,0002; IC50 p<0,0001), NLRP3 (IC25 p= 0,0501; IC50 p= 0,0056) e IL-1ꞵ (IC25 p<0,0001; IC50 p<0,0001). Essa é a primeira demonstração do potencial anticâncer da Salamandrina-I e esses resultados oferecem informações importantes que podem permitir o design de futuras moléculas bioativas usando a Salamandrina-I como modelo.