Obtenção da proteína metacaspase recombinante de Trypanosoma cruzi pelo sistema de expressão baseado em vetor de baculovírus (BEV)

Abstract

A Doença de Chagas (DC) é classificada pela Organização Mundial da Saúde (OMS) como uma doença tropical negligenciada. Ela atinge 21 países em situação endêmica na América Latina e também há casos em outros países e continentes. No Brasil, são 1,9 milhão de pessoas infectadas pelo parasito Tripanosoma cruzi, o agente etiológico da DC. Ele possui um ciclo de vida heteroxênico e várias formas de transmissão. No hospedeiro vertebrado infectado há diferentes respostas contra o parasito. Dentre elas está a apoptose, que pode ser ativada por via extrínseca ou via intrínseca à célula envolvendo uma cascata de caspases, que são proteínas encontradas em metazoários. Diante dessa resposta o T. cruzi apresenta mecanismos de evasão às defesas das células hospedeiras. Esses possivelmente incluem a participação de proteínas chamadas metacaspases (MCAs), encontradas em fungos, protozoários e plantas. Na literatura científica não há tantas pesquisas relacionadas à proteína MCA de T. cruzi. Entretanto trabalhos evidenciam a existência de cinco genes de MCAs em Trypanosoma brucei. Em T. cruzi foram encontrados os genes TcMCA3 e TcMCA5. O objetivo do presente trabalho foi a utilização da ferramenta de expressão baseada em vetores de baculovírus (do inglês, baculovirus expression vector, BEV). A obtenção do bacmídeo recombinante com o gene TcMCA3 de T. cruzi pelo sistema BEV apresentou bons resultados e trouxe como perspectiva expressá-lo em células de inseto pelo sistema BEV, como também a purificara proteína resultante para análises em imunodiagnósticos da DC e estudos de evasão à apoptose.