Caracterização do mutante da hidrofobina hydA de Fonsecaea pedrosoi

Abstract

O gene hydA produz uma proteína hidrofóbica da classe das hidrofobinas. As hidrofobinas são um grupo de proteínas de baixo peso molecular que apresentam em sua constituição vários aminoácidos hidrofóbicos, quatro pontes dissulfeto e oito resíduos de cisteína em padrão conservado. A camada hidrofóbica produzida por essas proteínas medeiam interações entre o fungo e ambiente, exercendo papéis no ciclo de vida e na patogenicidade dos fungos, além de modular a resposta imune do hospedeiro. Por meio da construção de um mutante knock out, foi possível analisar o papel do gene hydA na biologia e patogenicidade de Fonsecaea pedrosoi, o principal agente etiológico da comoblastomicose. Mediante a construção de uma árvore filogenética foi possível identificar alta similaridade de HydA com hidrofobinas de classe 1, porém por microscopia eletrônica de varredura não foi observada a presença de rodlet na superfíce do conídio de F. pedrosoi. A ausência do gene proporcionou alterações na superfície e na morfologia do conídio o que pode ter contribuído para alterar o caráter hidrofóbico do conídio, visto que apresentaram maior afinidade pela água. Essas alterações não influenciaram na susceptibilidade a agentes osmóticos e estressores da parede com exceção ao SDS em que o mutante se mostrou mais resistente. Por microscopia de fluorescência, identificou-se que a expressão da proteína HydA parece ser conídio-específica. É provável que HydA não exerça um papel imunoprotetor na CBM, mas promove modulação da IL-10. Nessa perspectiva, apesar de HydA parecer não desempenhar um papel importante na imunoproteção é essencial para estrutura, morfogênese e hidrofobicidade do conídio de F.pedrosoi