Priming epigenético com foco em EHMT induz hiperexpressão de TP53 e TP73 e induz apoptose na leucemia linfoide aguda

Abstract

As histona-lisina N-metiltrasferase 1 (EHMT1) e EHTM2 são duas enzimas metiltransferases que promovem a monometilação e dimetilação da lisina 9 da histona 3. Essas enzimas foram observadas hiperexpressas em diversos tipos de câncer e sua desregulação está associada ao desenvolvimento e progressão de diferentes tumores. Neste trabalho, investigamos o nível de expressão de EHTM1/EHMT2 na Leucemia Linfoide Aguda (LLA) e se a modulação dessas enzimas poderia ter algum impacto celular ou molecular na linhagem de LLA Jurkat. Para isso, usamos o inibidor seletivo para EHMT1/EHTM2, UNC0646, e investigamos seu efeito sobre a proliferação e viabilidade celular pelo ensaio de MTT. Além disso, a apoptose celular e as bases moleculares que poderiam estar envolvidas nos desfechos observados foram determinadas por citometria de fluxo (Anexina V/Iodeto de Propídeo) e PCR em tempo real, respectivamente. Nossa análise do banco de dados Bloodspot confirmou que tanto o EHMT1 quanto o EHMT2 apresentavam expressão elevada na LLA. Curiosamente, observamos também que a inibição dessas metiltransferases diminuiu significativamente a viabilidade celular da linhagem Jurkat de maneira dose dependente (p < 0,0001). Consequentemente, a inibição de EHTM1/EHMT2 promoveu a apoptose das células leucêmicas, que foi acompanhada pelo aumento da expressão de P53 (p = 0,006), TP73 (p < 0,0001), BAX (p = 0,001) e MDM4 (p = 0,01). Em suma, esses resultados indicaram que a inibição de EHMT1/EHMT2 induz a expressão de genes pró apoptóticos na LLA, promovendo a morte celular. Mais importante, que a modulação dessas histonas metiltranferases pode representar um alvo epigenético promissor para o tratamento da LLA.