Avaliação do efeito citotóxico em células B16F10 e CCD1059SK e do efeito na atividade da tirosinase do extrato de um fungo endofítico

Abstract

A melanina é principal responsável em humanos pela pigmentação dos cabelos, olhos e pele, sendo produzida pelos melanócitos através da melanogênese, num processo catalisado pela tirosinase e outras proteínas relacionadas à tirosinase. O vitiligo é uma doença autoimune que se caracteriza pela perda de pigmentação da pele e o estresse oxidativo parece desempenhar um papel importante na patogênese da doença. O objetivo deste projeto foi avaliar a citotoxicidade e o efeito na atividade da tirosinase do extrato de um fungo endofítico isolado de folhas de Bauhinia variegata, com atividade antioxidante já descrita, com o intuito de verificar sua possível utilização no tratamento do vitiligo. Para isso, o efeito do extrato na atividade da tirosinase foi avaliado in vitro. O extrato do fungo diminuiu a atividade da tirosinase em cerca de 70% em relação ao controle. Para o ensaio de citotoxicidade, células da linhagem B16F10 (melanoma de camundongo) e CCD-1059Sk (fibroblastos humanos) foram cultivadas e tratadas com diferentes concentrações do extrato e expostas ou não à radiação UVA (5 J/cm2). O extrato não foi citotóxico para as células B16F10, porém foi citotóxico quando o tratamento com o extrato foi associado à exposição das células à radiação UVA. Em células CCD-1059Sk, o tratamento com o extrato também não foi citotóxico, mas neste caso houve proliferação celular quando o tratamento das células com o extrato foi associado à exposição das células à radiação UVA. A avaliação da produção de melanina e da atividade da tirosinase nas células B16F10 tratadas com o extrato nas concentrações de 3,12 μg/mL e 12,5 μg/mL mostraram que não houve um aumento significativo na produção de melanina ou na atividade da tirosinase celular. Portanto, os resultados obtidos demonstraram que nas concentrações testadas, o extrato do fungo BvFVII não conseguiu induzir a produção de melanina em células B16F10, e promoveu uma diminuição na atividade da tirosinase de cogumelo, usada no ensaio in vitro. Concentrações mais altas do extrato serão testadas futuramente.