Caracterização de cultura primária de células gengivais de pacientes com mutações nos genes FAM20A e FAM20C

Abstract

A família de quinases denominada “family with sequence similarity 20” compreende 3 proteínas (FAM20A, FAM20B e FAM20C) dentre elas, as FAM20A e FAM20C que são essenciais no controle da biomineralização. Mutações recessivas em seus respectivos genes resultam nas síndromes conhecidas como Síndrome de Raine (RNS; OMIM #259775) e Síndrome Esmalte-Renal (ERS; OMIM #204690). A RNS, causada por mutações no gene FAM20C é uma rara desordem hereditária caracterizada principalmente por esclerose óssea generalizada, anomalias craniofaciais e calcificações ectópicas. Além das alterações no metabolismo ósseo, os pacientes que sobrevivem à infância apresentam amelogênese imperfeita, defeitos na mineralização da dentina, fibromatose gengival e calcificações ectópicas gengivais. A ERS, causada por mutações no gene FAM20A, é caracterizada pela presença de nefrocalcinose e manifestações bucais que incluem amelogênese imperfeita hipoplásica, fibromatose gengival, calcificações ectópicas em gengiva e polpa, hamartomas foliculares e defeitos da erupção dentária. A fim de melhor compreender as alterações gengivais associadas às duas síndromes, o objetivo desse estudo foi estabelecer e caracterizar culturas primárias de fibroblastos gengivais de pacientes com RNS e ERS. Foram estabelecidas culturas a partir de tecidos gengivais pela técnica explant de pacientes com RNS, ERS e indivíduos não sindrômicos. A atividade metabólica, capacidade de cicatrização e potencial de mineralização foram analisados, respectivamente, por meio dos ensaios de MTT (brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio), cicatrização de ferida e coloração de nódulos de mineralização com vermelho de alizarina. No período de 48 horas, foi observado diferença estatística da atividade metabólica celular entre o controle e o grupo RNS1. Foram observadas diferenças significativas na capacidade de migração entre as culturas primárias RNS2 e as populações controle. Em relação ao 23 potencial de mineralização os grupos sindrômicos mostraram maior potencial quando comparados com as populações controle. Novos estudos com essas populações que avaliem o tempo de dobramento populacional e a expressão gênica das culturas com maior potencial de mineralização são necessários para uma melhor compreensão desses resultados.