Estabelecimento de protocolo para infecção de células PC12-ADH com o Zika vírus

Abstract

O vírus da Zíka (ZIKAV) é transmitido pela picada do mosquito fêmea Aedes aegypti, pertence ao gênero dos Flavivirus, e é um dos vírus mais importantes emergentes do mundo. A epidemia só ganhou destaque quando diversos casos de microcefalia foram registrados em crianças, filhas de mulheres suspeitas de infecção com ZIKAV no Brasil, e também quando o aparecimento de adultos com Sindrome de Guillain-Barré foram confirmados, em pessoas com histórico de infecção por este vírus. Assim, a comunidade científica busca cada vez mais entender e descobrir o motivo pelo qual o ZIKAV pode causar sintomas neurológicos nos pacientes infectados. Com isso, buscando contribuir com esses estudos, utilizamos modelo experimental in vitro de células PC12-ADH, que são derivadas do feocromocitoma de ratos transplantados, e expressam propriedades neuronais por meio do crescimento de neuritos quando estimuladas com o Fator de Crescimento do Nervo (NGF). Buscamos então estabelecer um modelo in vitro de infecção pelo ZIKAV nas células PC12-ADH, primeiramente implementando protocolo de diferenciação destas células e investigando a densidade ideal de células/poço para uma visualização satisfatória do crescimento de neuritos. A densidade de células foi determinada a 80.000/poço e subsequentemente as mesmas foram expostas ao ZIKAV para a infecção, que foi avaliada pela detecção da glicoproteína-E do envelope viral por meio da técnica de Western blot. Embora o protocolo de diferenciação celular de PC12-ADH em neurônios tenha sido estabelecido, não observamos infecção das células pelo ZIKAV nas condições experimentais avaliadas. Novos ensaios serão necessários para investigar a susceptibilidade de células PC12-ADH ao ZIKAV.