Influência do 4-hidróxitamoxifeno sobre a viabilidade de células da granulosa saudáveis considerando o contexto do câncer de mama.

Abstract

Introdução: O câncer é uma das doenças mais incidentes atualmente e dentre os tipos mais comuns está o câncer de mama. Este tipo de câncer é raro em mulheres antes dos 35 anos, porém mulheres nesta faixa etária também podem ser acometidas apresentando prognóstico pior quando comparado a mulheres mais velhas. Quando o câncer de mama apresenta resposta endócrina, o tratamento de escolha é a terapia endócrina, no qual há indicação na literatura do uso de tamoxifeno 20 mg/dia durante um período de 5-10 anos, sua metabolização resulta em produtos, como o 4-hidróxitamoxifeno. Objetivos: avaliar os efeitos que o 4-hidróxitamoxifeno possui sobre a viabilidade de células da granulosa que compõem o folículo ovariano e influenciam diretamente a maturação ovocitária. Métodos: As células da granulosa foram obtidas a partir de ovários bovinos (espécie Bos taurus). Para avaliar o efeito de 4-hidróxitamoxifeno, as células da granulosa foram cultivadas na presença de 0μM, 1 μM e 2 μM de 4-hidróxitamoxifeno, em seguida incubou-se as células com o metabólito por um período de 48 horas. Utilizou-se como metodologias de análise PCR real time para os genes BAX, BCL2 e actina, o teste de exclusão por trypan blue, MTT e avaliação morfológica. Resultados e discussão: o grupo 0 μM apresentou maior proporção de células viáveis evidenciadas pelo padrão morfológico normal, baixas quantidades de células coradas por trypan blue (31,2%), alta atividade mitocondrial no teste de MTT e genes com perfil de expressão que denota atividade antiapoptótica. Os grupos 1 μM e 2 μM apresentaram 0% de viabilidade, baseado no trypan blue, e 31,15 e 29,8%, respectivamente, baseado na metodologia MTT. Assim, indica-se altas taxas de morte celular, sendo que a expressão gênica não foi concordante com o perfil de viabilidade encontrado in vitro. Conclusão: Tamoxifeno foi citotóxico para as células da granulosa em cultura.