Avaliação da atividade proteolítica salivar de paciente com Síndrome de Sjögren

Abstract

A Síndrome de Sjögren (SS) é uma doença sistêmica autoimune, com inflamação crônica de glândulas exócrinas, principalmente as salivares e lacrimais. Diversos trabalhos têm relatado a saliva como um meio potencial de diagnóstico de várias doenças, pois a identificação de biomarcadores salivares permitiria o diagnóstico de patologias. O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade enzimática de proteases na saliva de pacientes com diagnóstico de Síndrome de Sjögren (SS) e de pacientes saudáveis, com intuito de identificar possíveis marcadores biológicos para SS. Para esse propósito, foram analisadas amostras de saliva total de 40 indivíduos, em estudo de caso controle. A saliva total estimulada foi coletada em jejum e, após centrifugada a 10.000 rpm, por 10 minutos, foi armazenada a -80ºC. As proteínas totais foram quantificadas. Para a caracterização da atividade proteolítica, as amostras foram testadas com substratos sintéticos e inibidores de proteases, em espectrofotômetro, e testadas por zimografia na presença de inibidores. A proteólise do substrato Gly-Pro-AMC e sua inibição pelo AEBSF indica que essa enzima pertence à família de serino-proteases, possivelmente uma DPP- 4. Em zimografia, as bandas de atividade inibidas pelo EDTA indicam que a atividade proteolítica pertence à família de metaloproteases (MMP), possivelmente MMP-2 e MMP-9. Os resultados obtidos sugerem que a atividade proteolítica salivar difere entre os grupos avaliados. Estudos mais aprofundados serão necessários, a fim de melhor compreender o papel das proteases estudadas na patogênese da SS.