Reatividade da 15-Desoxi12,14-Prostaglandina J-2 frente a proteínas quinase A e Cɛ

Abstract

A prostaglandina 15d-PGJ2 é produto final da via da enzima COX2. A 15d-PGJ2 é uma prostaglandina que apresenta efeitos anti-inflamatórios, anti-proliferativos e protetores celulares. A PKA e PKCɛ estão envolvidas em diversas patologias, portanto, novos inibidores de proteínas quinases são importantes ferramentas farmacológicas. E a reação de Michael é altamente estudada para o desenvolvimento de novos inibidores de proteína quinase, esses inibidores já são explorados pela indústria, principalmente nas áreas de inflamação e oncologia. A molécula da 15d-PGJ2 é um eletrófilo para a reação de Michael. Um exemplo de nucleófilo para essa reação são as cisteínas presentes em proteínas celulares. Por isso, este trabalho irá analisar o potencial de ligação da 15d-PGJ2 na PKA e PKCɛ. Foi utilizado a técnica de espectrometria de massa utilizando o MALDI-TOF. Para avaliar a ligação foi analisado o peso molecular das quinases na presença ou ausência da 15d-PGJ2. Não foi possível avaliar essa ligação através de nossos espectros provavelmente devido a problemas com nossas amostras. Nos primeiros testes acreditamos que houve supressão do sinal das proteínas por causa de excesso de sal. Em testes posteriores, já feita a dessalinização das amostras, os sinais não foram detectados. Isso deve ter acontecido provavelmente pela perda das proteínas no momento da dessalinização pelo método utilizado. A 15d-PGJ2 apresenta grande potencial como inibidora de proteínas quinase, porém, não se conseguiu avaliar esta ligação neste trabalho. Este estudo servirá como uma pré-validação para futuros preparos dessa amostra.