Desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de quitosana para liberação prolongada de cetoconazol na mucosa vaginal

Abstract

A candidíase vulvovaginal (CVV) é uma infecção fúngica da vulva e da vagina, causada por várias espécies de Candida spp.; sendo que entre 80% e 90% dos casos reportados de CVV são causadas pela espécie Candida albicans. Levando-se em consideração que a terapia tópica traz inúmeras vantagens para o tratamento se comparado com à terapia oral, como redução de custos, de toxicidade e de efeitos adversos, e que os produtos tópicos existentes não favorecem a permanência de agentes antifúngicos no local por tempo suficiente para que eles atuem, este estudo teve como objetivo desenvolver e caracterizar uma formulação tópica baseada em nanopartículas de quitosana (NP-QS) contendo o cetoconazol (CET), na tentativa de melhorar o tratamento tópico de CVV. Um método analítico para a determinação de CET extraído de mucosa utilizando cromatografia líquida de alta eficiência foi inicialmente padronizado e validado, seguindo as orientações de agências reguladoras nacional e internacional. As NP-CET foram preparados seguindo-se a técnica de geleificação ionotrópica e foram caracterizadas avaliando-se seu diâmetro hidrodinâmico, índice de polidispersão (IPD) e potencial zeta. As NP-CET apresentaram diâmetro de 351,5 ± 32,88, IPD = 0,493 ± 0,060 e potencial zeta positivo (+ 34,6 ± 3,9). A eficiência de encapsulação do fármaco (EE%) foi então calculada como sendo 77,8 ± 6,1 quando uma relação polímero/fármaco igual a 5:1 (p/p) foi usada no preparo. No que se refere à morfologia, as NP-CET apresentaram-se esféricas com distribuição de tamanho monodispersa. A capacidade mucoadesiva mostrada pelas NP-CET frente as dispersões de mucina deve garantir a permanência delas em contato com a mucosa vaginal por longos períodos após a aplicação. Os estudos in vitro de liberação do CET a partir das NP-CET em membranas de acetato de celulose mostraram que o sistema é capaz de controlar a liberação do fármaco durante pelo menos 12 h. A atividade antifúngica da formulação contendo NP-CET foi avaliada in vitro em comparação com a formulação de fármaco livre e NP-QS. Após 24 h de incubação das cepas de Candida albicans com as formulações, observou-se que as NP-CET apresentaram uma concentração inibitória minima (CIM90) de 0,58 μg/mL, valor superior ao do fármaco livre (0,07 μg/mL), mas condizente com o fato de as NP-QS sustentarem a liberação do CET por mais de 24 h. Finalmente, estudos de permeação ex vivo realizados em células de difusão verticais montadas com mucosa de suínos revelaram que as NP-CET foram capazes de promover a retenção de 8,4 ± 2,2 μg/cm2 do fármaco na mucosa após 2 horas de experimento. Tendo por base que 0,58 μg/mL de CET é capaz de eliminar 90% da carga fúngica, a quantidade de CET que penetrou a mucosa deve ser mais que suficiente para controlar o crescimento fúngico no local. Segue-se, portanto, que as NP-CET devem apresentar-se como uma alternativa promissora para o tratamento tópico de CVV.